東莞電泳加工起決定性的幾個因素 1.電場強(qiáng)度 電場強(qiáng)度是指每釐米的電位梯度(電勢梯度)。電場強(qiáng)度對泳動速度起著重要的功用。電場強(qiáng)度愈高,則帶電顆粒泳動越快。例如濾紙電泳時,在濾紙二端相距25 cm處測得電位降為250V,則電場強(qiáng)度為250/25=10V/cm。根據(jù)電場強(qiáng)度的不同,濾紙電泳可分為: (1)常壓(100-500V)電泳。其電場強(qiáng)度為2-10V/cm,分離時間較長,從數(shù)小時到數(shù)天,適合分離蛋白質(zhì)等大分子物質(zhì)。 (2)高壓(2000-10000V)電泳。其電場強(qiáng)度為50-200V/cm,電泳時間很短,有時只需幾分鐘。多用於分離胺基酸、核甘酸、醣類等小分子物質(zhì)。 2. 溶液pH 東莞電泳加工為使電泳時pH恆定,必須採用緩衝液作為電極緩衝液,溶液的pH值決定帶電顆粒的解離程度,亦即決定其所帶電荷的多少。對蛋白質(zhì)而言,溶液pH值離等電點(pI)越遠(yuǎn),則顆粒所帶的淨(jìng)電荷越多,泳動速度也月快;反之,則越慢。因此分離某種蛋白質(zhì)混合液時,應(yīng)選擇一個合適的pH,使欲分離的各種蛋白質(zhì)所帶的電荷數(shù)量有較大的差異,更有利於彼此的分開。 3. 電滲現(xiàn)象 東莞電泳加工液體在電場中,對於一個固體支持物的相對移動,稱為電滲(electrosmosis)現(xiàn)象。。例如濾紙電泳,由於濾紙上吸附OH-離子帶負(fù)電荷,而與紙相接觸的水溶液帶正電荷,液體便會向負(fù)極移動,並攜帶顆粒同時移動。所以電泳時,顆粒泳動的表面速度、顆粒本身的泳動速度,等於電滲攜帶顆粒的移動速度之和。若顆粒原來向負(fù)極移動,則其表觀速度將比泳動速度快;若原來向正極移動,則其表面速度(apparent velocity)將比泳動速度慢。為校正這一誤差,可用中性物質(zhì)糊精(dextrin)、蔗糖或葡萄糖(dextran)等與樣品同時做濾紙電泳,然後將其移動距離自實驗結(jié)果中除去。 |
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