跑第一向時(shí)，為什么要設(shè)定一個(gè)電流的最大值電壓（50 μ A/ 膠）？電流的平方和功率成正比。電流增大，功率增大，放出的熱量也隨之增大，就會(huì)導(dǎo)致膠條的溫度增加。當(dāng)溫度超過(guò) 30 攝氏度時(shí)，液里的尿素就容易解離，產(chǎn)生一些極性分子，從而對(duì)等電聚焦產(chǎn)生影響。跑第一向時(shí)，為什么剛開(kāi)始的電壓比較低，而后逐漸增高？

     第二向 SDS-PAGE電泳

1. 配制 12%的丙烯酰胺凝膠。

2. 待凝膠凝固后， 倒去分離膠表面的MilliQ水、 乙醇或水飽和正丁醇，用MilliQ 水沖洗。

3. 配制膠條平衡緩沖液 I

4. 在桌上先放置干的厚濾紙，聚焦好的膠條膠面朝上放在干的厚濾紙上。將另 一份厚濾紙用 MilliQ水浸濕，擠去多余水分，然后直接置于膠條上，輕輕吸 干膠條上的礦物油及多余樣品，這樣可以減少凝膠染色時(shí)出現(xiàn)的縱條紋。

5. 將膠條轉(zhuǎn)移至樣品水化盤(pán)中，加入 6ml(17cmIPG)平衡緩沖液 I ，在水平搖床 上緩慢搖晃 15 分鐘。

6. 配制膠條平衡緩沖液 II 。

7. 第一次平衡結(jié)束后，取出膠條將之豎在濾紙上瀝去多余的液體，放入平衡緩 沖液 II 中，繼續(xù)在水平搖床上緩慢搖晃 15 分鐘。

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